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  4. The conserved threonine-rich region of the HCF-1<sub>PRO</sub> repeat activates promiscuous OGT:UDP-GlcNAc glycosylation and proteolysis activities.
 
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Titre

The conserved threonine-rich region of the HCF-1<sub>PRO</sub> repeat activates promiscuous OGT:UDP-GlcNAc glycosylation and proteolysis activities.

Type
article
Institution
UNIL/CHUV/Unisanté + institutions partenaires
Périodique
Journal of Biological Chemistry  
Auteur(s)
Kapuria, V.
Auteure/Auteur
Röhrig, U.F.
Auteure/Auteur
Waridel, P.
Auteure/Auteur
Lammers, F.
Auteure/Auteur
Borodkin, V.S.
Auteure/Auteur
van Aalten, DMF
Auteure/Auteur
Zoete, V.
Auteure/Auteur
Herr, W.
Auteure/Auteur
Liens vers les personnes
Waridel, Patrice  
Herr, Winship  
Lammers, Fabienne  
Zoete, Vincent  
Röhrig, Ute  
Kapuria, Vaibhav  
Liens vers les unités
CIG  
Ludwig Lausanne Branch (LLB)  
Institut Suisse de Bioinformatique  
Dép. d'Oncologie Fondamentale  
ISSN
1083-351X
Statut éditorial
Publié
Date de publication
2018-11-16
Volume
293
Numéro
46
Première page
17754
Dernière page/numéro d’article
17768
Peer-reviewed
Oui
Langue
anglais
Notes
Publication types: Journal Article ; Research Support, Non-U.S. Gov't
Publication Status: ppublish
Résumé
O-Linked GlcNAc transferase (OGT) possesses dual glycosyltransferase-protease activities. OGT thereby stably glycosylates serines and threonines of numerous proteins and, via a transient glutamate glycosylation, cleaves a single known substrate-the so-called HCF-1 <sub>PRO</sub> repeat of the transcriptional co-regulator host-cell factor 1 (HCF-1). Here, we probed the relationship between these distinct glycosylation and proteolytic activities. For proteolysis, the HCF-1 <sub>PRO</sub> repeat possesses an important extended threonine-rich region that is tightly bound by the OGT tetratricopeptide-repeat (TPR) region. We report that linkage of this HCF-1 <sub>PRO</sub> -repeat, threonine-rich region to heterologous substrate sequences also potentiates robust serine glycosylation with the otherwise poor R <sub>p</sub> -αS-UDP-GlcNAc diastereomer phosphorothioate and UDP-5S-GlcNAc OGT co-substrates. Furthermore, it potentiated proteolysis of a non-HCF-1 <sub>PRO</sub> -repeat cleavage sequence, provided it contained an appropriately positioned glutamate residue. Using serine- or glutamate-containing HCF-1 <sub>PRO</sub> -repeat sequences, we show that proposed OGT-based or UDP-GlcNAc-based serine-acceptor residue activation mechanisms can be circumvented independently, but not when disrupted together. In contrast, disruption of both proposed activation mechanisms even in combination did not inhibit OGT-mediated proteolysis. These results reveal a multiplicity of OGT glycosylation strategies, some leading to proteolysis, which could be targets of alternative molecular regulatory strategies.
Sujets

Amino Acid Motifs

Amino Acid Sequence

Endopeptidases/geneti...

Endopeptidases/metabo...

Glycosylation

Host Cell Factor C1/g...

Host Cell Factor C1/m...

Humans

Molecular Dynamics Si...

Multifunctional Enzym...

Multifunctional Enzym...

Mutation

N-Acetylglucosaminylt...

N-Acetylglucosaminylt...

Proteolysis

Stereoisomerism

Substrate Specificity...

Uridine Diphosphate N...

Uridine Diphosphate N...

O-GlcNAcylation

O-linked N-acetylgluc...

enzyme mechanism

glycobiology

host-cell factor-1

post-translational mo...

PID Serval
serval:BIB_2C5B11AB86FD
DOI
10.1074/jbc.RA118.004185
PMID
30224358
WOS
000450409500008
Permalien
https://iris.unil.ch/handle/iris/39880
Open Access
Oui
Date de création
2018-11-27T08:36:06.135Z
Date de création dans IRIS
2025-05-20T13:58:20Z
Fichier(s)
En cours de chargement...
Vignette d'image
Nom

J. Biol. Chem.-2018-Kapuria-17754-68.pdf

Version du manuscrit

published

Taille

3.34 MB

Format

Adobe PDF

PID Serval

serval:BIB_2C5B11AB86FD.P001

URN

urn:nbn:ch:serval-BIB_2C5B11AB86FD5

Somme de contrôle

(MD5):74c445590b8c00182ffe5aa54297dee5

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